Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ ΠΊΠ°ΠΊ пСрСводится: Π‘Π»ΠΎΠ²Π°Ρ€ΡŒ ΠΈ ΠΎΠ½Π»Π°ΠΉΠ½ ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π²ΠΎΠ΄ Π½Π° английский, русский, Π½Π΅ΠΌΠ΅Ρ†ΠΊΠΈΠΉ, французский, украинский ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠ΅ языки

Π‘ΠΎΠ΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Π½ΠΈΠ΅

РастСния Π˜ΠΠ’Π˜Π’Π Πž Ρ‡Ρ‚ΠΎ это

Π‘Ρ‚Π°Ρ‚ΡŒΠΈ β€Ί Π˜ΠΠ’Π˜Π’Π Πž

Π’Ρ‹Ρ€Π°Ρ‰ΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ растСний Π² ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€Π΅ in vitro β€” это соврСмСнный ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Π²Π΅Π³Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ размноТСния растСний, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ позволяСт ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΡ‚ΡŒ гСнСтичСски ΠΎΠ΄Π½ΠΎΡ€ΠΎΠ΄Π½Ρ‹ΠΉ, ΠΎΡ‡ΠΈΡ‰Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ ΠΎΡ‚ вирусов посадочный ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π» для Π·Π°ΠΊΠ»Π°Π΄ΠΊΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹ΡˆΠ»Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΠ»Π°Π½Ρ‚Π°Ρ†ΠΈΠΉ ягод, садов, насаТдСний энСргСтичСских ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€, массового тираТирования Π΄Π΅ΠΊΠΎΡ€Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Ρ… ΠΈ

  1. Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ рассада Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ
  2. Π§Ρ‚ΠΎ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚ саТСнСц Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ
  3. КакиС саТСнцы Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ ΠΈΠ»ΠΈ Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΊΠΈ
  4. Как пСрСводится in vitro
  5. Π§Ρ‚ΠΎ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠ° ΠΈΠ½ Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ
  6. Бколько стоит рассада астр
  7. Как Π²Ρ‹Ρ€Π°ΡΡ‚ΠΈΡ‚ΡŒ растСниС Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠ΅
  8. Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ ΠœΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅
  9. КакиС способы размноТСния Ρƒ растСний
  10. Бколько Π»Π΅Ρ‚ плодоносит куст Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ
  11. Бколько кустов Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ ΡΠ°ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ
  12. НуТно Π»ΠΈ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ куст Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ
  13. Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ ΠΈ Ρ‡Π΅ΠΌ Π²Ρ‹ Π·Π°Π½ΠΈΠΌΠ°Π΅Ρ‚Π΅ΡΡŒ
  14. Π§Ρ‚ΠΎ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚ Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ для in vitro диагностики
  15. Как называСтся ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Π²Ρ‹Ρ€Π°Ρ‰ΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ растСний Π² Π·Π°ΠΊΡ€Ρ‹Ρ‚ΠΎΠΌ Π³Ρ€ΡƒΠ½Ρ‚Π΅
  16. Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ прСимущСства Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ клонального микроразмноТСния растСний
  17. Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ рассада Ρ‚Ρ€Π΅ΠΉ
  18. Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ Π·Π°ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ΡΡ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ размноТСния
  19. Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ Π‘ΠΏΠΎΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ растСний
  20. Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ КлональноС ΠœΠΈΠΊΡ€ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠ½ΠΎ проводится
  21. Бколько Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π΄Π°Π΅Ρ‚ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ куст
  22. Π’ ΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΌ мСсяцС ΡΠ°ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ саТСнцы Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ
  23. Какой сорт Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ ΠΏΠΎΡΠ°Π΄ΠΈΡ‚ΡŒ
  24. Как пСрСвСсти for what
  25. Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ Π“Π΅Π½Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ растСний
  26. ΠšΠ°ΠΊΠΎΠ²Ρ‹ этапы Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ клонального микроразмноТСния растСний
  27. Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ Π·Π°ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ΡΡ ΡΡƒΡ‚ΡŒ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ размноТСния растСний Сгэ
  28. ΠŸΠΎΡ‡Π΅ΠΌΡƒ Ρ‡Π΅Ρ€Π½Π΅ΡŽΡ‚ Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΊΠΈ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ
  29. Π“Π΄Π΅ Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ ΠΏΠΎΡΠ°Π΄ΠΈΡ‚ΡŒ куст Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ
  30. МоТно Π»ΠΈ ΡƒΠΊΠΎΡ€Π΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Π²Π΅Ρ‚ΠΊΡƒ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ
  31. Как называСтся ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ выращивания растСний Π² Π·Π°ΠΊΡ€Ρ‹Ρ‚ΠΎΠΌ Π³Ρ€ΡƒΠ½Ρ‚Π΅
  32. Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ Π·Π°ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ΡΡ ΡΡƒΡ‚ΡŒ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ размноТСния растСний

Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ рассада Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ

ΠŸΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΡΡ‚Π²ΠΎ саТСнцСв Π² условиях in vitro β€” это, ΠΏΠΎ сути, ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅. Π’ Π»Π°Π±ΠΎΡ€Π°Ρ‚ΠΎΡ€Π½Ρ‹Ρ… условиях ΠΈΠ· ΠΈΠ·ΠΎΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ‚ΠΊΠ°Π½ΠΈ матСринского растСния Π±Π΅Ρ€ΡƒΡ‚ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΈ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Ρ‰Π°ΡŽΡ‚ ΠΈΡ… Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΡƒ. Бпустя врСмя удаСтся ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΎΠ³Ρ€ΠΎΠΌΠ½ΠΎΠ΅ число Π½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… растСний, Π½Π° гСнСтичСском ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½Π΅ Π°Π±ΡΠΎΠ»ΡŽΡ‚Π½ΠΎ схоТих с матСринским экзСмпляром.

Π§Ρ‚ΠΎ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚ саТСнСц Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ

In vitro β€” Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚ Β«Π² стСклС»

Если Ρ†Π΅Π»ΡŒ состоит Π² Ρ‚ΠΎΠΌ, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ быстро ΠΈ качСствСнно Π²Ρ‹Ρ€Π°ΡΡ‚ΠΈΡ‚ΡŒ Π½Π΅ΠΊΠΎΠ΅ мноТСство ΠΎΠ΄ΠΈΠ½Π°ΠΊΠΎΠ²ΠΎ Π·Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… саТСнцСв (Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€, ΠΌΠ°Π»ΠΈΠ½Ρ‹, Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Π΅ΠΆΠ΅Π²ΠΈΠΊΠΈ) Ρ‚ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΡ‰Π΅ Π²Π·ΡΡ‚ΡŒ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ Π·Π°Π²Π΅Π΄ΠΎΠΌΠΎ Π·Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ экзСмпляр растСния ΠΈ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠΈΡ‚ΡŒ Π΅Π³ΠΎ Π²Π΅Π³Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎ.

КакиС саТСнцы Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ ΠΈΠ»ΠΈ Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΊΠΈ

По Ρ€Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Π°ΠΌ исслСдований установлСно, Ρ‡Ρ‚ΠΎ кусты, ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ ΠΈΠ½-Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡŽΡ‚ большим количСством Π»ΠΈΡΡ‚ΡŒΠ΅Π², большим Ρ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€ΠΎΠΌ листовой пластины, большим количСством ΠΏΠΎΠ±Π΅Π³ΠΎΠ² Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ вСтвлСния, Π° Ρ‚Π°ΠΊ ΠΆΠ΅ большСй ΡƒΡ€ΠΎΠΆΠ°ΠΉΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ Ρ‡Π΅ΠΌ Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΊΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ кусты.

Как пСрСводится in vitro

Π€Ρ€Π°Π·Π° in vitro («Ин Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎΒ»; с Π»Π°Ρ‚. β€” Β«Π² стСклС») β€” Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½ ΠΈ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΈΠΊΠ° выполнСния экспСримСнтов, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° экспСримСнты проводятся Β«Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠ΅Β» β€” Π² искусствСнных условиях, Π²Π½Π΅ ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° ΠΈΠ»ΠΈ СстСствСнной срСды.

Π§Ρ‚ΠΎ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠ° ΠΈΠ½ Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ

Π“ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠ° высокорослая (Vaccinium corymbosum L.) относится ΠΊ сСмСйству ВСрСсковыС (Ericaceae). Π’ ΡƒΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½Π½ΠΎΠΌ ΠΊΠ»ΠΈΠΌΠ°Ρ‚Π΅ кустарник достигаСт высоты Π΄ΠΎ 2-2,5 ΠΌ. ΠŸΠ»ΠΎΠ΄Ρ‹ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ высокорослой β€” ягоды Π΄ΠΈΠ°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€ΠΎΠΌ Π΄ΠΎ 3 см, собранныС Π² Π³Ρ€ΠΎΠ·Π΄ΠΈ.

Бколько стоит рассада астр

198 β‚½/ΡˆΡ‚.

Как Π²Ρ‹Ρ€Π°ΡΡ‚ΠΈΡ‚ΡŒ растСниС Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠ΅

Π’Π½Π°Ρ‡Π°Π»Π΅ с ΠΏΠΎΠ±Π΅Π³ΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… участков растСния бСрутся срСзы Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ. Они ΠΏΠΎΠΌΠ΅Ρ‰Π°ΡŽΡ‚ΡΡ Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠΈ с ΠΆΠΈΠ΄ΠΊΠΈΠΌ раствором (Π³ΠΎΡ€ΠΌΠΎΠ½Ρ‹, Π²ΠΈΡ‚Π°ΠΌΠΈΠ½Ρ‹, микроэлСмСнты). Π’ Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… условиях кусочСк листа ΠΈΠ»ΠΈ корня быстро «прСвращаСтся» Π² ΡΠ°ΠΌΠΎΡΡ‚ΠΎΡΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ растСниС с Π·Π°Ρ‡Π°Ρ‚ΠΊΠ°ΠΌΠΈ всСх Π²Π΅Π³Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹Ρ… ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΎΠ².

Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ ΠœΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅

Π Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ in vitro (ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅) β€” Π²Π΅Π³Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ растСний ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ матСринского ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°, базируСтся Π½Π° явлСнии тотипотСнтности (способности ΠΈΠ· ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Ρ‚ΡŒ Ρ†Π΅Π»Ρ‹ΠΉ Π½ΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ).

КакиС способы размноТСния Ρƒ растСний

РастСния Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ°ΡŽΡ‚ΡΡ бСсполым ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²Ρ‹ΠΌ способом. Π’ процСссС бСсполого размноТСния участвуСт ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ Ρ€ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΡΠΊΠΈΠΉ ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ Π΄Π²ΡƒΡ… ΠΈΠ»ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΏΠΎΡ‚ΠΎΠΌΠΊΠΎΠ². ΠŸΠΎΡ‚ΠΎΠΌΠΊΠΈ ΠΈΠ΄Π΅Π½Ρ‚ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ собой ΠΈ Ρ€ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΡΠΊΠΎΠΌΡƒ ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΡƒ. БСсполоС Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ΄Ρ€Π°Π·Π΄Π΅Π»ΡΡŽΡ‚ Π½Π° собствСнно бСсполоС (спорообразованиС) ΠΈ Π²Π΅Π³Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅.

Бколько Π»Π΅Ρ‚ плодоносит куст Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ

Π£Ρ€ΠΎΠΆΠ°ΠΈ ягод Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ высокой Π΄ΠΎΡΡ‚ΠΈΠ³Π°ΡŽΡ‚ 5-10 ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Ρ‚ΠΎΠ½Π½ с 1 Π³Π° (с куста ΡΡ‚Π°Ρ€ΡˆΠ΅ 6 Π»Π΅Ρ‚ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΎΡ‚ 5 Π΄ΠΎ 10 ΠΊΠ³ ягод). ΠšΡƒΡΡ‚ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π½Π° ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΌ мСстС ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ расти ΠΈ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄ΠΎΠ½ΠΎΡΠΈΡ‚ΡŒ Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ 30 Π»Π΅Ρ‚.

Бколько кустов Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ ΡΠ°ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ

ΠžΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡ‚ΠΈ посадки Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ садовой.

Как ΠΌΡ‹ ΡƒΠΆΠ΅ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΈΠ»ΠΈ Π²Ρ‹ΡˆΠ΅, рядом Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΡΠ°Π΄ΠΈΡ‚ΡŒ 2 β€” 3 саТСнца Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅Ρ‡ΠΈΡ‚ΡŒ Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠ΅Π΅ пСрСкрСстноС ΠΎΠΏΡ‹Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅. Π›ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ ΠΏΠΎΡΠ°Π΄ΠΈΡ‚ΡŒ Ρ‚Ρ€ΠΈ кустика Π½Π° случай, Ссли ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ Π²Π΄Ρ€ΡƒΠ³ ΠΏΠΎΠ³ΠΈΠ±Π½Π΅Ρ‚. Π’Ρ‹ΠΊΠΎΠΏΠ°ΠΉΡ‚Π΅ посадочныС ямы Π³Π»ΡƒΠ±ΠΈΠ½ΠΎΠΉ ΠΈ Π΄ΠΈΠ°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€ΠΎΠΌ 45 см Π½Π° расстоянии 1,5 ΠΌ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ ΠΎΡ‚ Π΄Ρ€ΡƒΠ³Π°.

НуТно Π»ΠΈ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ куст Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ

Когда куст Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ достигнСт 5-Ρ‚ΠΈ Π»Π΅Ρ‚Π½Π΅Π³ΠΎ возраста для усилСния Π΅Π³ΠΎ роста ΠΈ обСспСчСния постоянного уроТая Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ произвСсти ΠΏΡ€ΠΎΡ€Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ куста. ΠŸΡ€ΠΎΡ€Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ускоряСт процСсс появлСния ΡΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ»Π΅Ρ‚Π½ΠΈΡ… ΠΏΠΎΠ±Π΅Π³ΠΎΠ² ΠΈ обСспСчиваСт рСгулярный ΡƒΡ€ΠΎΠΆΠ°ΠΉ.

Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ ΠΈ Ρ‡Π΅ΠΌ Π²Ρ‹ Π·Π°Π½ΠΈΠΌΠ°Π΅Ρ‚Π΅ΡΡŒ

Π˜ΠΠ’Π˜Π’Π Πž β€” ΠΎΠ΄Π½Π° ΠΈΠ· ΠΊΡ€ΡƒΠΏΠ½Π΅ΠΉΡˆΠΈΡ… мСдицинских Π³Ρ€ΡƒΠΏΠΏ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ°Π½ΠΈΠΉ Π² России, ΡΠΏΠ΅Ρ†ΠΈΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π°ΡΡΡ Π½Π° Π»Π°Π±ΠΎΡ€Π°Ρ‚ΠΎΡ€Π½ΠΎΠΉ диагностикС ΠΈ ΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΈΠΈ мСдицинских услуг, основанная Π² 1995 Π³ΠΎΠ΄Ρƒ.

Π§Ρ‚ΠΎ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚ Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ для in vitro диагностики

In vitro диагностичСскиС тСсты β€” мСдицинскиС тСсты, ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡ‹Π΅ Π² ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΠΈΡ€ΡƒΠ΅ΠΌΠΎΠΌ ΠΎΠΊΡ€ΡƒΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π²Π½Π΅ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°. In vitro β€” латинскоС Π²Ρ‹Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΎΠ·Π½Π°Ρ‡Π°ΡŽΡ‰Π΅Π΅, Π±ΡƒΠΊΠ². β€” Β«Π² стСклС».

Как называСтся ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Π²Ρ‹Ρ€Π°Ρ‰ΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ растСний Π² Π·Π°ΠΊΡ€Ρ‹Ρ‚ΠΎΠΌ Π³Ρ€ΡƒΠ½Ρ‚Π΅

ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Π³ΠΈΠ΄Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΊΠΈ ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Π³ΠΈΠ΄Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΊΠΈ основан Π½Π° ΠΈΠ·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΊΠΎΡ€Π½Π΅Π²ΠΎΠΉ систСмы растСния, Π° ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡ€Π΅Ρ‚Π½ΠΎ ΠΊΠ°ΠΊ происходит ΠΏΠΈΡ‚Π°Π½ΠΈΠ΅ растСния. Π£Ρ‡Π΅Π½Ρ‹Π΅ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π»ΠΈ дСсятки Π»Π΅Ρ‚, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΏΠΎΠ½ΡΡ‚ΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΆΠ΅ ΠΊΠΎΡ€Π΅Π½ΡŒ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅ΠΊΠ°Π΅Ρ‚ ΠΈΠ· ΠΏΠΎΡ‡Π²Ρ‹.

Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ прСимущСства Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ клонального микроразмноТСния растСний

Π’ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ провСдСния Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ всСго Π³ΠΎΠ΄Π°; Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠ°Ρ‚ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ процСсса выращивания. ΠŸΠΈΠΎΠ½Π΅Ρ€ΠΎΠΌ клонального микроразмноТСния считаСтся французский ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ΠΉ Π–ΠΎΡ€ΠΆ ΠœΠΎΡ€Π΅Π»ΡŒ, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ Π² 50-Ρ… Π³ΠΎΠ΄Π°Ρ… Π΄Π²Π°Π΄Ρ†Π°Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ Π²Π΅ΠΊΠ° ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΠ» ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ растСния β€” Ρ€Π΅Π³Π΅Π½Π΅Ρ€Π°Π½Ρ‚Ρ‹ ΠΎΡ€Ρ…ΠΈΠ΄Π΅ΠΉ.

Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ рассада Ρ‚Ρ€Π΅ΠΉ

ΠšΠ»ΡƒΠ±Π½ΠΈΠΊΠ° Ρ‚Ρ€Π΅ΠΉ: Ρ‡Ρ‚ΠΎ это Π·Π° рассада

Tray plants β€” ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Π΅ΠΉΠ½Π΅Ρ€Π½Ρ‹Π΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π³ΠΎΡ€ΡˆΠΎΡ‡Π½Ρ‹Π΅ растСния. НазваниС ΡƒΠΊΠ°Π·Ρ‹Π²Π°Π΅Ρ‚ Π½Π° Ρ‚ΠΈΠΏ хранСния, распространСния рассады. Зная особСнности ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ Ρ‚ΠΈΠΏΠ°, смоТСтС ΠΏΠ»Π°Π½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΏΠ»Π°Π½Ρ‚Π°Ρ†ΠΈΠΈ, ΠΏΠ»ΠΎΡ‰Π°Π΄ΡŒ ΠΏΠΎΠ΄ Π½ΠΈΡ…, количСство ΡƒΠ΄ΠΎΠ±Ρ€Π΅Π½ΠΈΠΉ, ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ² ΠΈ Ρ‚. Π΄.

Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ Π·Π°ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ΡΡ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ размноТСния

По своСй сути ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈΡ‡Π½ΠΎ Π²Π΅Π³Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠΌΡƒ Ρ‚ΠΈΠΏΡƒ размноТСния растСний с Ρ‚ΠΎΠΉ лишь Ρ€Π°Π·Π½ΠΈΡ†Π΅ΠΉ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΎΠ½ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅ΠΊΠ°Π΅Ρ‚ Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠ΅ Π² условиях in vitro, Π³Π΄Π΅ ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΈΠ·ΠΎΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ Π² ΠΈΡ‚ΠΎΠ³Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΡ‚ΡŒ достаточно большоС количСство Π½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… растСний.

Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ Π‘ΠΏΠΎΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ растСний

Π‘ΠΏΠΎΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ β€” это Ρ‚ΠΈΠΏ бСсполого размноТСния, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ осущСствляСтся с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ спСциализированных ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ β€” спор.

Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ КлональноС ΠœΠΈΠΊΡ€ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠ½ΠΎ проводится

КлональноС ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ β€” это ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ растСний Π½Π΅ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²Ρ‹ΠΌ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ Π² условиях in vitro, гСнСтичСски ΠΈΠ΄Π΅Π½Ρ‚ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Ρ… исходному экзСмпляру. Π’ΠΎΡ‚ΠΈΠΏΠΎΡ‚Π΅Π½Ρ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π»Π΅ΠΆΠΈΡ‚ Π² основС клонального микроразмноТСния, это ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Ρ€Π°ΡΡ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Π΄Π°Π²Π°Ρ‚ΡŒ Π½Π°Ρ‡Π°Π»ΠΎ Ρ†Π΅Π»ΠΎΠΌΡƒ Ρ€Π°ΡΡ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΌΡƒ ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΡƒ.

Бколько Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π΄Π°Π΅Ρ‚ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ куст

ΠŸΠ΅Ρ€Π²Ρ‹ΠΉ ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ†Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ ΡƒΡ€ΠΎΠΆΠ°ΠΉ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΠΎΠ±Ρ€Π°Ρ‚ΡŒ Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· Ρ‚Ρ€ΠΈ Π³ΠΎΠ΄Π° послС посадки саТСнцСв. ΠŸΡ€ΠΈ соблюдСнии всСх условий выращивания ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Ρ€Π°ΡΡΡ‡ΠΈΡ‚Ρ‹Π²Π°Ρ‚ΡŒ Π½Π° 4-8 ΠΊΠ³ ягод Π·Π° сСзон с ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ куста.

Π’ ΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΌ мСсяцС ΡΠ°ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ саТСнцы Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ

Π“ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΡƒ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²Ρ‹ΡΠ°ΠΆΠΈΠ²Π°Ρ‚ΡŒ с вСсны Π΄ΠΎ осСни. Π‘ΠΌΠΎΡ‚Ρ€ΠΈΡ‚Π΅ Π½Π° внСшний Π²ΠΈΠ΄ саТСнца, ΠΎΠ½ΠΈ всСгда Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄Π°Π²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ Π² ΠΊΠ°Π΄ΠΊΠ°Ρ… Π½Π° 2 Π»ΠΈΡ‚Ρ€Π° ΠΈΠ»ΠΈ Π³ΠΎΡ€ΡˆΠΊΠ°Ρ… Π½Π° 1,5-2 Π»ΠΈΡ‚Ρ€Π°, Ссли куст Π΄Π²ΡƒΡ…Π»Π΅Ρ‚Π½ΠΈΠΉ. Если куст ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ»Π΅Ρ‚Π½ΠΈΠΉ, Ρ‚ΠΎ хотя Π±Ρ‹ Π½Π° Π»ΠΈΡ‚Ρ€.

Какой сорт Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ ΠΏΠΎΡΠ°Π΄ΠΈΡ‚ΡŒ

Π‘ΠΎΡ€Ρ‚ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π“Π΅Ρ€Π±Π΅Ρ€Ρ‚ β€” ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΈΠ· Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠΈΡ…, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ Π²Ρ‹ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚Π΅ Π²Ρ‹Ρ€Π°ΡΡ‚ΠΈΡ‚ΡŒ Π² своСм саду. Π­Ρ‚ΠΎ Π² ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΠΌ смыслС слова высокорослая Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠ° β€” высота куста ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π΄ΠΎΡΡ‚ΠΈΠ³Π°Ρ‚ΡŒ 2,2 ΠΌ! ΠšΠΎΠ½Π΅Ρ‡Π½ΠΎ, ΠΏΠ»ΠΎΠ΄Ρ‹ Π½Π΅ Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠ΅ гигантскиС, ΠΊΠ°ΠΊ Ρƒ Бонуса, Π½ΠΎ всС ΠΆΠ΅ довольно ΠΊΡ€ΡƒΠΏΠ½Ρ‹Π΅ β€” ΠΎΠΊΠΎΠ»ΠΎ 2 см Π² Π΄ΠΈΠ°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π΅.

Как пСрСвСсти for what

ΠŸΠ΅Ρ€Π΅Π²ΠΎΠ΄ Β«for what?Β» Π½Π° русский для Ρ‡Π΅Π³ΠΎ? Π Π°Π΄ΠΈ Ρ‡Π΅Π³ΠΎ? Π—Π° Ρ‡Ρ‚ΠΎ?

Π§Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ΅ Π“Π΅Π½Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ растСний

Π“Π΅Π½Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½Ρ‹ΠΌ называСтся Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ сСмян. Оно ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ бСсполым ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²Ρ‹ΠΌ. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ способом Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ°ΡŽΡ‚ΡΡ ΠΏΠ°ΠΏΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π½ΠΈΠΊΠΈ, Ρ…Π²ΠΎΡ‰ΠΈ ΠΈ ΠΌΡ…ΠΈ.

ΠšΠ°ΠΊΠΎΠ²Ρ‹ этапы Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ клонального микроразмноТСния растСний

Π­Ρ‚Π°ΠΏΡ‹ клонального микроразмноТСния: β€” ΠΎΡ‚Π±ΠΎΡ€ подходящих эксплантов, ΠΈΡ… стСрилизация ΠΈ пСрСнос Π½Π° ΠΏΠΈΡ‚Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ срСду; β€” собствСнно ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅; β€” ΡƒΠΊΠΎΡ€Π΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ±Π΅Π³ΠΎΠ² с ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ Π°Π΄Π°ΠΏΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ ΠΈΡ… ΠΊ ΠΏΠΎΡ‡Π²Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΌ условиям; β€” Π²Ρ‹Ρ€Π°Ρ‰ΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ растСний Π² условиях Ρ‚Π΅ΠΏΠ»ΠΈΡ†Ρ‹ ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²ΠΊΠ° ΠΈΡ… ΠΊ посадкС Π² ΠΏΠΎΠ»Π΅. ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ.

Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ Π·Π°ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ΡΡ ΡΡƒΡ‚ΡŒ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ размноТСния растСний Сгэ

Биология Π•Π“Π­ 2023

Π’ΠžΠŸΠ ΠžΠ‘: Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ Π·Π°ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ΡΡ ΡΡƒΡ‚ΡŒ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ размноТСния растСний? ΠžΠ’Π’Π•Π’: Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ примСняСтся для выращивания ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΈ Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ растСний. НСкотороС количСство ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Ρ‰Π°ΡŽΡ‚ Π² ΠΏΠΈΡ‚Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ срСду ΠΈ Π²Ρ‹Ρ€Π°Ρ‰ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠ΅ врСмя.

ΠŸΠΎΡ‡Π΅ΠΌΡƒ Ρ‡Π΅Ρ€Π½Π΅ΡŽΡ‚ Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΊΠΈ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ

Как ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, ΠΏΠΎΡ‡Π΅Ρ€Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ±Π΅Π³ΠΎΠ² Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ высокорослой Π²Ρ‹Π·Π²Π°Π½ΠΎ ΠΏΠΎΠ΄ΠΌΠ΅Ρ€Π·Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ, Π° Π½Π΅ болСзнью. Π§Π°Ρ‰Π΅ всСго Ρ‚Π°ΠΊΡƒΡŽ ΠΊΠ°Ρ€Ρ‚ΠΈΠ½Ρƒ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π½Π°Π±Π»ΡŽΠ΄Π°Ρ‚ΡŒ Ρ€Π°Π½Π½Π΅ΠΉ вСсной. ΠžΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Π±ΡƒΡ‚ΠΎΠ½Ρ‹ Ρ†Π²Π΅Ρ‚ΠΎΠ² ΠΈ Π»ΠΈΡΡ‚ΡŒΠ΅Π² становятся Ρ‡Π΅Ρ€Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΡ€ΠΈΡ‡Π½Π΅Π²Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΈ Π½Π΅ Ρ€Π°Π·Π²ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ΡΡ. ΠžΠ΄Π½ΠΎΠ»Π΅Ρ‚Π½ΠΈΠ΅ Π²Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ ΠΏΠΎΠ³ΠΈΠ±Π½ΡƒΡ‚ΡŒ.

Π“Π΄Π΅ Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ ΠΏΠΎΡΠ°Π΄ΠΈΡ‚ΡŒ куст Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ

Π“ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΡƒ Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ ΡΠ°ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ Π½Π° солнСчном мСстС, Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠΎ освСщСнном Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ всСго свСтового дня. ПосаТСнная Π² Ρ‚Π΅Π½ΠΈ, ΠΎΠ½Π° ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π²ΠΎΠΎΠ±Ρ‰Π΅ Π½Π΅ ΠΏΠ»ΠΎΠ΄ΠΎΠ½ΠΎΡΠΈΡ‚ΡŒ ΠΈΠ»ΠΈ Π΄Π°Π²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΎΡ‡Π΅Π½ΡŒ малСнькиС ΡƒΡ€ΠΎΠΆΠ°ΠΈ.

МоТно Π»ΠΈ ΡƒΠΊΠΎΡ€Π΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Π²Π΅Ρ‚ΠΊΡƒ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ

Π£ΠΊΠΎΡ€Π΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΊΠΎΠ²

МоТно ΡΠ΄Π΅Π»Π°Ρ‚ΡŒ Π΅Ρ‰Π΅ ΠΏΡ€ΠΎΡ‰Π΅ β€” Π²Ρ‹Π½ΡƒΡ‚ΡŒ Π³Ρ€ΡƒΠ½Ρ‚ Π½Π° Π³Π»ΡƒΠ±ΠΈΠ½Ρƒ 20-25 сантимСтров, Π° вмСсто Π½Π΅Π³ΠΎ Π½Π°ΡΡ‹ΠΏΠ°Ρ‚ΡŒ ΠΏΠΎΠ΄Π³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ для укорСнСния субстрат. Π§Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΊΠΈ Π³ΠΎΠ»ΡƒΠ±ΠΈΠΊΠΈ Π²Ρ‹ΡΠ°ΠΆΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ Π½Π° грядку ΠΏΠΎ схСмС 5Γ—5, 5Γ—7, 5Γ—10 ΠΈΠ»ΠΈ 10Γ—10 сантимСтров.

Как называСтся ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ выращивания растСний Π² Π·Π°ΠΊΡ€Ρ‹Ρ‚ΠΎΠΌ Π³Ρ€ΡƒΠ½Ρ‚Π΅

ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Π³ΠΈΠ΄Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΊΠΈ ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ Π³ΠΈΠ΄Ρ€ΠΎΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΊΠΈ основан Π½Π° ΠΈΠ·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΊΠΎΡ€Π½Π΅Π²ΠΎΠΉ систСмы растСния, Π° ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡ€Π΅Ρ‚Π½ΠΎ ΠΊΠ°ΠΊ происходит ΠΏΠΈΡ‚Π°Π½ΠΈΠ΅ растСния. Π£Ρ‡Π΅Π½Ρ‹Π΅ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π»ΠΈ дСсятки Π»Π΅Ρ‚, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΏΠΎΠ½ΡΡ‚ΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΆΠ΅ ΠΊΠΎΡ€Π΅Π½ΡŒ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅ΠΊΠ°Π΅Ρ‚ ΠΈΠ· ΠΏΠΎΡ‡Π²Ρ‹.

Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ Π·Π°ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ΡΡ ΡΡƒΡ‚ΡŒ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ размноТСния растСний

По своСй сути ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈΡ‡Π½ΠΎ Π²Π΅Π³Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠΌΡƒ Ρ‚ΠΈΠΏΡƒ размноТСния растСний с Ρ‚ΠΎΠΉ лишь Ρ€Π°Π·Π½ΠΈΡ†Π΅ΠΉ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΎΠ½ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅ΠΊΠ°Π΅Ρ‚ Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠ΅ Π² условиях in vitro, Π³Π΄Π΅ ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΈΠ·ΠΎΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ Π² ΠΈΡ‚ΠΎΠ³Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΡ‚ΡŒ достаточно большоС количСство Π½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… растСний.

  • Π’ Ρ‡Π΅ΠΌ Π·Π°ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ΡΡ ΡΡƒΡ‚ΡŒ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π° ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ размноТСния растСний Сгэ

Β«Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎΒ» ΠΈ Β«ΠŸΠ΅Ρ€Π΅ΠΊΡ€Ρ‘ΡΡ‚ΠΎΠΊΒ» ΠΏΡ€ΠΈΠ·Ρ‹Π²Π°ΡŽΡ‚ ΠΏΠ΅Ρ€Π΅ΠΉΡ‚ΠΈ Π½Π° Π—ΠžΠ– β€” Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ Π½Π° vc.ru

Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎ

Β«Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎΒ» ΠΈ торговая ΡΠ΅Ρ‚ΡŒ Β«ΠŸΠ΅Ρ€Π΅ΠΊΡ€Ρ‘ΡΡ‚ΠΎΠΊΒ» Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π»ΠΈ совмСстный ΠΏΡ€ΠΎΠ΅ΠΊΡ‚ Β«ΠŸΠ΅Ρ€Π΅Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅ Π½Π° Π—ΠžΠ– вмСстС с Π½Π°ΠΌΠΈΒ» ΠΈ Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· 3 мСсяца послС старта ΠΏΡ€ΠΎΠ΄Π°ΠΆ ΠΏΡ€ΠΎΠ°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ, ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ комплСксы тСстов ΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ наибольшСй ΠΏΠΎΠΏΡƒΠ»ΡΡ€Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ. Π’ Ρ…ΠΎΠ΄Π΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ΅ΠΊΡ‚Π° Β«Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎΒ» Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π»Π° 6 Π½Π°Π±ΠΎΡ€ΠΎΠ² Π»Π°Π±ΠΎΡ€Π°Ρ‚ΠΎΡ€Π½Ρ‹Ρ… Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ², ΠΊΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… ΠΎΡ€ΠΈΠ΅Π½Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ Π½Π° ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ Ρ‚ΠΈΠΏ питания ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π°Π±ΠΎΡ€ ΠΏΡ€ΠΈΠ²Ρ‹Ρ‡Π΅ΠΊ ΠΈ ΠΏΠΎΠΌΠΎΠ³Π°Π΅Ρ‚ ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ состояниС ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° ΠΈ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΡƒΡŽ Π½Π΅Ρ…Π²Π°Ρ‚ΠΊΡƒ Π²ΠΈΡ‚Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ² ΠΈ ΠΌΠΈΠ½Π΅Ρ€Π°Π»ΠΎΠ².

529 просмотров

Π Π΅ΠΉΡ‚ΠΈΠ½Π³ популярности исслСдований

Π‘Π°ΠΌΡ‹ΠΌ популярным комплСксом стал «Анализ уровня Π²ΠΈΡ‚Π°ΠΌΠΈΠ½Π° D ΠΈ ΠΌΠΈΠ½Π΅Ρ€Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±ΠΌΠ΅Π½Π°Β», ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°Π»ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ 3 тысяч Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ. Π’ комплСкс входят исслСдования Π½Π° Π²ΠΈΡ‚Π°ΠΌΠΈΠ½ D, ΠΊΠ°Π»ΡŒΡ†ΠΈΠΉ, ΠΌΠ°Π³Π½ΠΈΠΉ ΠΈ фосфор. На Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΌ мСстС ΠΏΠΎ популярности исслСдованиС «ВСгСтарианство» – ΠΎΠ±Ρ‰ΠΈΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΈ, Π±Π΅Π»ΠΊΠ°, ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·Π° ΠΈ Ρ„Π΅Ρ€Ρ€ΠΈΡ‚ΠΈΠ½Π° – сдали Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ тысячи Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ. И Ρ‚Ρ€Π΅Ρ‚ΡŒΠ΅ мСсто занял комплСкс Β«ΠœΠ°ΠΊΡ€ΠΎ ΠΈ микроэлСмСнты» – Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ 500 Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ. ИсслСдованиС Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚ ΠΆΠ΅Π»Π΅Π·ΠΎ, Ρ†ΠΈΠ½ΠΊ, сСлСн, мСдь, ΠΊΠ°Π»ΡŒΡ†ΠΈΠΉ ΠΈ ΠΌΠ°Π³Π½ΠΈΠΉ. МинимальноС количСство ΠΏΠΎΠΊΡƒΠΏΠ°Ρ‚Π΅Π»Π΅ΠΉ Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°Π»ΠΈ комплСкс Β«Π’Π΅Π³Π°Π½Ρ‹Β» – ΠΎΠ±Ρ‰ΠΈΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΈ, Π°Π»ΡŒΠ±ΡƒΠΌΠΈΠ½, гомоцистСин, ΠΊΠ°Π»ΡŒΡ†ΠΈΠΉ, Π²ΠΈΡ‚Π°ΠΌΠΈΠ½ D. Π˜Π½Ρ‚Π΅Ρ€Π΅ΡΠ½ΠΎ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ большая Ρ‡Π°ΡΡ‚ΡŒ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄Π°ΠΆ этого комплСкса ΠΏΡ€ΠΈΡˆΠ»Π°ΡΡŒ Π½Π° Π‘Π΅Π²Π΅Ρ€Π½Ρ‹ΠΉ Кавказ ΠΈ Π”Π°Π»ΡŒΠ½ΠΈΠΉ Восток.

ВсСго Π·Π° ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ Ρ‚Ρ€ΠΈ мСсяца ΠΏΡ€Π΅Π΄Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ воспользовались 5,9 тысяч Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ ΠΏΠΎ России. Π’ Ρ‚ΠΎΠΏ-3 Ρ€Π΅Π³ΠΈΠΎΠ½ΠΎΠ² ΠΏΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄Π°ΠΆΠ°ΠΌ вошли Москва, Московская ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΡŒ, Π‘Π΅Π²Π΅Ρ€ΠΎ-Π—Π°ΠΏΠ°Π΄ ΠΈ Π‘ΠΈΠ±ΠΈΡ€ΡŒ.

Π—ΠžΠ– для ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ свой

КСйс Β«Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎΒ» ΠΈ Ρ‚ΠΎΡ€Π³ΠΎΠ²ΠΎΠΉ сСти Β«ΠŸΠ΅Ρ€Π΅ΠΊΡ€Ρ‘ΡΡ‚ΠΎΠΊΒ» Π² ΠΎΡ‡Π΅Ρ€Π΅Π΄Π½ΠΎΠΉ Ρ€Π°Π· ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π», Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π² соврСмСнных рСалиях ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ°Π½ΠΈΠΈ Π΄Π°ΠΆΠ΅ ΠΈΠ· Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹Ρ… сфСр бизнСса, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΌΠ΅Π΄ΠΈΡ†ΠΈΠ½Π° ΠΈ Ρ€ΠΈΡ‚Π΅ΠΉΠ», ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ ΠΎΠ±ΡŠΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΡΡ‚ΡŒΡΡ, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π²Π°Ρ‚ΡŒ качСствСнныС ΠΈ ΡƒΠ΄ΠΎΠ±Π½Ρ‹Π΅ Π² использовании ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚Ρ‹ для своих ΠΊΠ»ΠΈΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠ².

Β«ΠŸΠΈΡ‰Π΅Π²Ρ‹Π΅ ΠΏΡ€ΠΈΠ²Ρ‹Ρ‡ΠΊΠΈ ΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π· ΠΆΠΈΠ·Π½ΠΈ ΠΎΠΊΠ°Π·Ρ‹Π²Π°ΡŽΡ‚ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ влияниС Π½Π° ΠΎΠ±Ρ‰Π΅Π΅ состояниС ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ°. ΠΠ°Ρ€ΡƒΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ€Π΅ΠΆΠΈΠΌΠ° питания ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ привСсти ΠΊ дисбалансу ΠΏΠΈΡ‚Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… вСщСств, Π»ΠΈΡˆΠ½Π΅ΠΌΡƒ вСсу ΠΈ ΡƒΡ…ΡƒΠ΄ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡŽ самочувствия. ΠŸΠΎΡΡ‚ΠΎΠΌΡƒ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΡ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ профилактичСскоС обслСдованиС ΠΈ Π΄Π΅Π»Π°Ρ‚ΡŒ это рСгулярно. ΠœΡ‹ заботимся ΠΎ своих покупатСлях, Ρ€Π°ΡΡˆΠΈΡ€ΡΡ Π—ΠžΠ–-ассортимСнт ΠΈ формируя ΠΏΡ€ΠΈΠ²Ρ‹Ρ‡ΠΊΠΈ ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ питания. Но Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠΌΠ½ΠΈΡ‚ΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π—ΠžΠ– для ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ свой, ΠΈ Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ ΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΌΠ°Ρ‚ΡŒ сСбя ΠΈ свой ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌ, совмСстно с ΠΏΠ°Ρ€Ρ‚Π½Ρ‘Ρ€Π°ΠΌΠΈ ΠΌΡ‹ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π»Π°Π³Π°Π΅ΠΌ нашим ΠΊΠ»ΠΈΠ΅Π½Ρ‚Π°ΠΌ исслСдования Π½Π° ΡΠΏΠ΅Ρ†ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π²Ρ‹Π³ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Ρ… условиях».

Π’Π°Ρ‚ΡŒΡΠ½Π° Π‘Ρ‚Π΅ΠΏΠ°Π½ΠΎΠ²Π°, Π”ΠΈΡ€Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ ΠΏΠΎ Π±Ρ€Π΅Π½Π΄Ρƒ ΠΈ долгосрочной Π»ΠΎΡΠ»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ Ρ‚ΠΎΡ€Π³ΠΎΠ²ΠΎΠΉ сСти Β«ΠŸΠ΅Ρ€Π΅ΠΊΡ€Ρ‘ΡΡ‚ΠΎΠΊΒ»

ΠŸΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅ΡΡ‚ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΈΠ· 6 комплСксов ΠΈ провСсти исслСдованиС ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²ΠΎ всСх мСдицинских офисах Β«Π˜Π½Π²ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎΒ». Для ΠΏΠΎΠΊΡƒΠΏΠ°Ρ‚Π΅Π»Π΅ΠΉ Β«ΠŸΠ΅Ρ€Π΅ΠΊΡ€Ρ‘ΡΡ‚ΠΊΠ°Β» дСйствуСт ΡΠΏΠ΅Ρ†ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Π°Ρ Ρ†Π΅Π½Π°. Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ Π²ΠΎΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ, Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°Ρ‚ΡŒ исслСдованиС ΠΈ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΡŠΡΠ²ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΊΠ°Ρ€Ρ‚Ρƒ ΠšΠ»ΡƒΠ±Π° Β«ΠŸΠ΅Ρ€Π΅ΠΊΡ€Ρ‘ΡΡ‚ΠΎΠΊΒ» ΠΏΡ€ΠΈ ΠΎΠΏΠ»Π°Ρ‚Π΅ Π² офисС.

ΠŸΡ€ΠΎΠ΅ΠΊΡ‚ Π·Π°ΠΏΡƒΡ‰Π΅Π½ Π² ΠΌΠ°Π΅ ΠΈ продлится Π΄ΠΎ 31 дСкабря 2021 Π³ΠΎΠ΄Π°. Π‘ΠΎΠ»ΡŒΡˆΠ΅ подробностСй ΠΏΠΎ ссылкС: https://www.invitro.ru/l/zozh-perekrestok/

ΠžΡΠ½ΠΎΠ²Ρ‹: трансляция in vitro | Thermo Fisher Scientific

Π‘ΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π· Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² in vitro Π² бСсклСточных экстрактах являСтся Π²Π°ΠΆΠ½Ρ‹ΠΌ инструмСнтом для молСкулярных Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΎΠ² ΠΈ ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ мноТСство ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ, Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Ρ Π±Ρ‹ΡΡ‚Ρ€ΡƒΡŽ ΠΈΠ΄Π΅Π½Ρ‚ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΡŽ Π³Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ² (Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€, ΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅ΠΎΠΌΠΈΠΊΠ°), Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΉ посрСдством синтСза ΡƒΠΊΠΎΡ€ΠΎΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Π³Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ², исслСдования Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡ„ΠΈΡ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ΠΏΡ€ΠΈΡ€ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Ρ… аминокислот для Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… исслСдований. ИспользованиС систСм трансляции in vitro ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΈΠΌΠ΅Ρ‚ΡŒ прСимущСства ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄ ЭкспрСссия Π³Π΅Π½Π° in vivo , ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° свСрхэкспрСссированный ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ токсичСн для ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ-хозяина, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ нСрастворим ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΡƒΠ΅Ρ‚ Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡ†Π° Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ, ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ подвСргаСтся быстрой протСолитичСской Π΄Π΅Π³Ρ€Π°Π΄Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Π°Π·Π°ΠΌΠΈ. Π’ ΠΏΡ€ΠΈΠ½Ρ†ΠΈΠΏΠ΅ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Π° Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΏΡ€ΠΈΠ³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²ΠΈΡ‚ΡŒ бСсклСточный экстракт для

in vitro трансляции мРНК ΠΈΠ· любого Ρ‚ΠΈΠΏΠ° ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ. На ΠΏΡ€Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠΊΠ΅ Π±Ρ‹Π»ΠΎ Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½ΠΎ лишь нСсколько бСсклСточных систСм для синтСза Π±Π΅Π»ΠΊΠ° in vitro . Как ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, эти систСмы происходят ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ, Π²ΠΎΠ²Π»Π΅Ρ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Π² высокий ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π΅Π½ΡŒ синтСза Π±Π΅Π»ΠΊΠ°. Π’ этой ΡΡ‚Π°Ρ‚ΡŒΠ΅ Π±ΡƒΠ΄ΡƒΡ‚ ΠΎΠ±ΡŠΡΡΠ½Π΅Π½Ρ‹ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄Ρ‹ ΠΊ синтСзу Π±Π΅Π»ΠΊΠ° in vitro (трансляция ΠΎΡ‡ΠΈΡ‰Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ РНК ΠΏΠΎ ΡΡ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡŽ с «связанной» ΠΈ «связанной» транскрипциСй: трансляция), Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ описаны основныС различия ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ эукариотичСскими ΠΈ прокариотичСскими бСсклСточными систСмами.
Β 

БыстрыС ссылки

  • Cell Free Expression
  • Translation Systems
  • Wheat Germ Extract
  • E. coli Cell-Free System
  • «Linked» & «Coupled» Systems
  • Important Elements
  • Products
  • Primer Sequences
  • Ordering Π˜Π½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΡ

БСсклСточныС систСмы экспрСссии

НаиболСС часто ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Π΅ бСсклСточныС систСмы трансляции состоят ΠΈΠ· экстрактов Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°, Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ ΠΈ ΠΊΠΈΡˆΠ΅Ρ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠ°Π»ΠΎΡ‡ΠΊΠΈ. ВсС ΠΎΠ½ΠΈ готовятся Π² Π²ΠΈΠ΄Π΅ сырых экстрактов, содСрТащих всС макромолСкулярныС ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚Ρ‹ (70S ΠΈΠ»ΠΈ 80S рибосомы, Ρ‚Π ΠΠš, Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ°Ρ†ΠΈΠ»-Ρ‚Π ΠΠš-синтСтазы, Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ, элонгации ΠΈ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΈ Ρ‚. Π΄.), Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡ‹Π΅ для трансляции экзогСнной РНК. Для обСспСчСния эффСктивной трансляции ΠΊΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ экстракт Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ΅Π½ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ аминокислотами, источниками энСргии (АВЀ, Π“Π’Π€), ΡΠ½Π΅Ρ€Π³ΠΎΡ€Π΅Π³Π΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠΌΠΈ систСмами (крСатинфосфат ΠΈ крСатинфосфокиназа для эукариотичСских систСм ΠΈ фосфоСнолпируват ΠΈ ΠΏΠΈΡ€ΡƒΠ²Π°Ρ‚ΠΊΠΈΠ½Π°Π·Π° для Π•. 9).0003 coli lysate) ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΡ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ (Mg2+, K+ ΠΈ Π΄Ρ€.).

БущСствуСт Π΄Π²Π° ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄Π° ΠΊ синтСзу Π±Π΅Π»ΠΊΠ° in vitro Π½Π° основС исходного гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π°: РНК ΠΈΠ»ΠΈ Π”ΠΠš. Π‘Ρ‚Π°Π½Π΄Π°Ρ€Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ систСмы трансляции, Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Ρ‹ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΈ экстракты Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚ РНК Π² качСствС ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Ρ‹; Ρ‚ΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ°ΠΊ «связанныС» ΠΈ «связанныС» систСмы Π½Π°Ρ‡ΠΈΠ½Π°ΡŽΡ‚ΡΡ с ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ† Π”ΠΠš, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠΊΡ€ΠΈΠ±ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ Π² РНК, Π° Π·Π°Ρ‚Π΅ΠΌ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ. КаТдая ΠΈΠ· этих систСм обсуТдаСтся Π½ΠΈΠΆΠ΅.

Π’Π΅Ρ€Ρ…

БистСмы ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π²ΠΎΠ΄Π°

Π›ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°
Π›ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ° прСдставляСт собой Π²Ρ‹ΡΠΎΠΊΠΎΡΡ„Ρ„Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΡƒΡŽ систСму синтСза эукариотичСских Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² in vitro, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅ΠΌΡƒΡŽ для трансляции экзогСнных РНК (Π»ΠΈΠ±ΠΎ ΠΏΡ€ΠΈΡ€ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Ρ…, Π»ΠΈΠ±ΠΎ созданных in vitro). In vivo Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚Ρ‹ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΡΡ‚Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‚ собой высокоспСциализированныС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ, Π² ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΡƒΡŽ ΠΎΡ‡Π΅Ρ€Π΅Π΄ΡŒ отвСтствСнныС Π·Π° синтСз Π³Π΅ΠΌΠΎΠ³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½Π°, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ составляСт Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ 90% Π±Π΅Π»ΠΊΠ°, Π²Ρ‹Ρ€Π°Π±Π°Ρ‚Ρ‹Π²Π°Π΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠΌ. Π­Ρ‚ΠΈ Π½Π΅Π·Ρ€Π΅Π»Ρ‹Π΅ эритроциты ΡƒΠΆΠ΅ потСряли свои ядра, Π½ΠΎ содСрТат Π°Π΄Π΅ΠΊΠ²Π°Ρ‚Π½ΡƒΡŽ мРНК, Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΏΠΎΠ»Π½Ρ‹ΠΉ Π°ΠΏΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚ трансляции для интСнсивного синтСза Π³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½Π°. ЭндогСнная мРНК Π³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½Π° ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΡƒΠ΄Π°Π»Π΅Π½Π° ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ с Π‘Π°2+-зависимой ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠΎΠΊΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·ΠΎΠΉ, которая ΠΏΠΎΠ·ΠΆΠ΅ инактивируСтся Ρ…Π΅Π»Π°Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π‘Π°2+ с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ EGTA. Ambion ΠΏΡ€Π΅Π΄Π»Π°Π³Π°Π΅Ρ‚ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·ΠΎΠΉ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ². Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ Ρ‚ΠΈΠΏ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° являСтся Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡˆΠΈΡ€ΠΎΠΊΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅ΠΌΠΎΠΉ РНК-зависимой бСсклСточной систСмой ΠΈΠ·-Π·Π° Π΅Π³ΠΎ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠ³ΠΎ Ρ„ΠΎΠ½Π° ΠΈ эффСктивного использования экзогСнных РНК Π΄Π°ΠΆΠ΅ Π² Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΡ… концСнтрациях (рис. 1). Π­ΠΊΠ·ΠΎΠ³Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΡΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π·ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ со ΡΠΊΠΎΡ€ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ, Π±Π»ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ ΠΊ наблюдаСмой Π² ΠΈΠ½Ρ‚Π°ΠΊΡ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚Π°Ρ€Π½Ρ‹Ρ… ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ….

Рис. 1. Бтандартная ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€Π° трансляции in vitro с использованиСм Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ° ΠΈΠ»ΠΈ экстракта Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹.

НСобработанный Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² транслируСт ΡΠ½Π΄ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ Π³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡƒΡŽ мРНК, ΡΠΊΠ·ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ РНК ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈ Ρ‚ΠΎ, ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΎΠ΅. Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ Ρ‚ΠΈΠΏ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅Ρ‚ΡΡ для изучСния ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° трансляции, Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€. ΠΈΠ·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ влияния ΠΈΠ½Π³ΠΈΠ±ΠΈΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ² Π½Π° Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΡΡ†ΠΈΡŽ Π³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½Π°. Как Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Π΅, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Ρ‹ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ° ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡŽΡ‚ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·Π½ΠΎΠΉ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ ΠΈ способны ΡΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ большоС количСство ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚Π°. Оба Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° подходят для синтСза Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΊΡ€ΡƒΠΏΠ½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈΠ· кэпированных ΠΈΠ»ΠΈ нСкэпированных РНК (эукариотичСских ΠΈΠ»ΠΈ вирусных).

Π’Π΅Ρ€Ρ…

Экстракт Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹

Экстракт Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ являСтся ΡƒΠ΄ΠΎΠ±Π½ΠΎΠΉ Π°Π»ΡŒΡ‚Π΅Ρ€Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²ΠΎΠΉ бСсклСточной систСмС с Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ΠΎΠΌ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°. Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ экстракт ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠ΅ Ρ„ΠΎΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠ΅ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈΠ·-Π·Π° Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠ³ΠΎ уровня эндогСнной мРНК. Π›ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ эффСктивно транслируСт ΡΠΊΠ·ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ РНК Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ², ΠΎΡ‚ вирусов ΠΈ Π΄Ρ€ΠΎΠΆΠΆΠ΅ΠΉ Π΄ΠΎ Π²Ρ‹ΡΡˆΠΈΡ… растСний ΠΈ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ…. Экстракт Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ рСкомСндуСтся для трансляции РНК, содСрТащСй нСбольшиС Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Ρ‹ Π΄Π²ΡƒΡ…Ρ†Π΅ΠΏΠΎΡ‡Π΅Ρ‡Π½ΠΎΠΉ РНК ΠΈΠ»ΠΈ окислСнныС Ρ‚ΠΈΠΎΠ»Ρ‹, ΠΈΠ½Π³ΠΈΠ±ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°. Экстракты ΠΊΠ°ΠΊ retic, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ РНК, Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΈ Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ Π³Π΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΠ΅ΠΌΡƒΡŽ транскрипция in vitro (см. рис. 1). ΠŸΡ€ΠΈ использовании РНК, синтСзированной in vitro , Π½Π°Π»ΠΈΡ‡ΠΈΠ΅ 5′-кэп-структуры ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΡƒΡΠΈΠ»ΠΈΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΡΡ†ΠΈΠΎΠ½Π½ΡƒΡŽ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ. Как ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, трансляция с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ экстрактов Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ большС зависит ΠΎΡ‚ кэпа, Ρ‡Π΅ΠΌ трансляция с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ экстрактов Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΠ°. Если кэпированиС РНК Π½Π΅Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΈ Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΈΠ· нСкэпированной мРНК Π½ΠΈΠ·ΠΎΠΊ, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΡƒΡŽ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΡƒΠ±ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Π² прокариотичСский Π²Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ ΠΈ ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ нСпосрСдствСнно с Π”ΠΠš-ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Ρ‹ Π² бСсклСточной систСмС E. coli .

Π’Π΅Ρ€Ρ…

БСсклСточная систСма E.

coli

БСсклСточная систСма E. coli состоит ΠΈΠ· Π½Π΅ΠΎΡ‡ΠΈΡ‰Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ экстракта, Π±ΠΎΠ³Π°Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ эндогСнной мРНК. Экстракт ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ Π²ΠΎ врСмя приготовлСния, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ эта эндогСнная мРНК Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»Π°ΡΡŒ ΠΈ впослСдствии Ρ€Π°Π·Ρ€ΡƒΡˆΠ°Π»Π°ΡΡŒ. ΠŸΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΡƒ ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½ΠΈ эндогСнной мРНК Π² ΠΏΡ€ΠΈΠ³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠΌ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π΅ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΠ΅, экзогСнный ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ Π»Π΅Π³ΠΊΠΎ идСнтифицируСтся. По ΡΡ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡŽ с эукариотичСскими систСмами экстракт E. coli ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ простой Π°ΠΏΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚ трансляции с ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ слоТным ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»Π΅ΠΌ Π½Π° ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½Π΅ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ позволяСт этой систСмС Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΠΎΡ‡Π΅Π½ΡŒ эффСктивной Π² синтСзС Π±Π΅Π»ΠΊΠ°. Π‘Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ экстракты часто Π½Π΅ΠΏΡ€ΠΈΠ³ΠΎΠ΄Π½Ρ‹ для трансляции РНК, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ экзогСнная РНК быстро расщСпляСтся эндогСнными Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·Π°ΠΌΠΈ. Π•ΡΡ‚ΡŒ Π½Π΅ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ вирусныС мРНК (TMV, STNV ΠΈ MS2), ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ эффСктивно Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ, ΠΏΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΡƒ ΠΎΠ½ΠΈ нСсколько устойчивы ΠΊ активности Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π· ΠΈ содСрТат ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΡ‡Π½ΡƒΡŽ структуру. Однако 9Экстракты 0067 E. coli идСально подходят для сопряТСнной транскрипции:трансляции с ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ† Π”ΠΠš.

Π’Π΅Ρ€Ρ…

«Бвязанная» ΠΈ «связанная» транскрипция: систСмы трансляции

Π’ стандартных рСакциях трансляции очищСнная РНК ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅Ρ‚ΡΡ Π² качСствС ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Ρ‹ для трансляции. Π‘ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΎΠΉ стороны, «связанныС» ΠΈ «связанныС» систСмы ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚ Π”ΠΠš Π² качСствС шаблона. РНК транскрибируСтся с Π”ΠΠš ΠΈ Π·Π°Ρ‚Π΅ΠΌ транслируСтся Π±Π΅Π· ΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΉ-Π»ΠΈΠ±ΠΎ очистки. Π’Π°ΠΊΠΈΠ΅ систСмы ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ ΡΠΎΡ‡Π΅Ρ‚Π°ΡŽΡ‚ РНК-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Ρƒ прокариотичСского Ρ„Π°Π³Π° ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΠΎΡ‚ΠΎΡ€ (T7, T3 ΠΈΠ»ΠΈ SP6) с экстрактами эукариот ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΊΠ°Ρ€ΠΈΠΎΡ‚ для синтСза Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈΠ· экзогСнных ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ† Π”ΠΠš. ΠœΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Ρ‹ Π”ΠΠš для Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΉ транскрипции:трансляции ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Ρ‹ Π² ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Π½Ρ‹Π΅ Π²Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ ΠΈΠ»ΠΈ созданы с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ПЦР (ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΏΡ€Π°ΠΉΠΌΠ΅Ρ€ΠΎΠ² для трансляционных ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†, Π³Π΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Ρ… ПЦР).

Linked Transcription:Translation
«Бвязанная» систСма прСдставляСт собой Π΄Π²ΡƒΡ…ΡΡ‚Π°Π΄ΠΈΠΉΠ½ΡƒΡŽ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΡŽ, ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡƒΡŽ Π½Π° транскрипции ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·ΠΎΠΉ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° с ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ трансляциСй Π² Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π΅ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ° ΠΈΠ»ΠΈ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π΅ Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ (рис. 2). ΠŸΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΡƒ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΈ транскрипции ΠΈ трансляции ΡΠ²Π»ΡΡŽΡ‚ΡΡ ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌΠΈ, каТдая ΠΈΠ· Π½ΠΈΡ… ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π° для обСспСчСния ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΠ³ΠΎ функционирования ΠΎΠ±ΠΎΠΈΡ…. И Π½Π°ΠΎΠ±ΠΎΡ€ΠΎΡ‚, ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΠ΅ коммСрчСски доступныС эукариотичСскиС сопряТСнныС систСмы транскрипции: трансляции скомпромСтировали ΠΎΠ΄Π½Ρƒ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ±Π΅ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΈ, Ρ‚Π°ΠΊ Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΎΠ½ΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ ΠΏΡ€ΠΎΠΈΡΡ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ Π² ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠ΅. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ приносится Π² ΠΆΠ΅Ρ€Ρ‚Π²Ρƒ удобству.

Рисунок 2. Linked in Vitro ΠŸΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€Π° транскрипции ΠΈ трансляции с использованиСм Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°.

ΠŸΠ°Ρ€Π½Π°Ρ транскрипция: трансляция
Π’ ΠΎΡ‚Π»ΠΈΡ‡ΠΈΠ΅ ΠΎΡ‚ эукариотичСских систСм, Π² ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… транскрипция ΠΈ трансляция происходят ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ, Π² E. coli транскрипция ΠΈ трансляция происходят Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, систСмы трансляции E. coli in vitro Π²Ρ‹ΠΏΠΎΠ»Π½ΡΡŽΡ‚ΡΡ Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΆΠ΅ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, Π² сочСтании, Π² ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΈ Ρ‚ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠ΅ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΎΠ΄Π½ΠΈΡ… ΠΈ Ρ‚Π΅Ρ… ΠΆΠ΅ условиях Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΈ (одностадийная рСакция; рис. 3). Π’ΠΎ врСмя транскрипции 5′-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ† РНК становится доступным для связывания с рибосомой ΠΈ подвСргаСтся трансляции, Π² Ρ‚ΠΎ врСмя ΠΊΠ°ΠΊ Π΅Π΅ 3′-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ† всС Π΅Ρ‰Π΅ транскрибируСтся. Π­Ρ‚ΠΎ Ρ€Π°Π½Π½Π΅Π΅ связываниС рибосом с РНК ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅Ρ€ΠΆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ‚ ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ транскрипта ΠΈ способствуСт эффСктивной трансляции. Π­Ρ‚Π° Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Π°Ρ систСма трансляции обСспСчиваСт ΡΡ„Ρ„Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΡƒΡŽ ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡŽ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΠ°ΠΊ прокариотичСских, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ эукариотичСских Π³Π΅Π½ΠΎΠ² Π·Π° ΠΊΠΎΡ€ΠΎΡ‚ΠΊΠΈΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΠ΅ΠΆΡƒΡ‚ΠΎΠΊ Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ. Для максимального Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΈ Π½Π°ΠΈΠ»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ΠΉ точности ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ ΡƒΠ±Π΅Π΄ΠΈΡ‚Π΅ΡΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Π° Π”ΠΠš ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ сайт связывания рибосом Π¨Π°ΠΉΠ½Π°-Π”Π°Π»ΡŒΠ³Π°Ρ€Π½ΠΎ Π²Ρ‹ΡˆΠ΅ ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π° ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ‚ΠΎΡ€Π°. ΠšΡΠΏΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ эукариотичСской РНК Π½Π΅ трСбуСтся. ИспользованиС 9Экстракт 0067 E. coli Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ устраняСт ΠΏΠ΅Ρ€Π΅ΠΊΡ€Π΅ΡΡ‚Π½ΡƒΡŽ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΈΠ»ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠ΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΡ‹, связанныС с эндогСнными Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ Π² эукариотичСских Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π°Ρ…. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, систСма экстрактов E. coli S30 допускаСт ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡŽ ΠΈΠ· Π”ΠΠš-Π²Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ², содСрТащих ΠΏΡ€ΠΈΡ€ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΠΎΡ‚ΠΎΡ€Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ E. coli (Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊ lac ΠΈΠ»ΠΈ tac).

Рис. 3. Бвязанная транскрипция in vitro: ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€Π° трансляции с использованиСм экстракта E. coli.

Π’Π΅Ρ€Ρ…

Π’Π°ΠΆΠ½Ρ‹Π΅ элСмСнты для трансляции

Π‘ΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‚ Π½Π΅ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ сущСствСнныС различия ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ транскриптами мРНК ΠΏΡ€ΠΎΠΊΠ°Ρ€ΠΈΠΎΡ‚ ΠΈ эукариот. Как ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, эукариотичСскиС мРНК Ρ…Π°Ρ€Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ·ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ двумя посттранскрипционными модификациями: 5′-7-ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΈΠ»-GTP-кэп ΠΈ 3′-ΠΏΠΎΠ»ΠΈ(А)-хвост. ОбС ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΠΈ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‚ ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ мРНК, прСдотвращая Π΄Π΅Π³Ρ€Π°Π΄Π°Ρ†ΠΈΡŽ. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, структура 5′-кэпа усиливаСт Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΡΡ†ΠΈΡŽ мРНК, помогая ΡΠ²ΡΠ·Ρ‹Π²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ с эукариотичСской рибосомой ΠΈ обСспСчивая распознаваниС ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π° AUG. Π­Ρ‚Π° функция ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π²Π°Ρ€ΡŒΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ Π² зависимости ΠΎΡ‚ систСмы трансляции ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡ€Π΅Ρ‚Π½ΠΎΠΉ синтСзируСмой мРНК. ΠšΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡƒΡΠ½Π°Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ 5′-GCCACCAUGG-3′, Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ извСстная ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ «Козака», считаСтся самым ΡΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌ сигналом связывания рибосом Π² эукариотичСской мРНК. Для эффСктивной ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ трансляции ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π²Ρ‹ΠΌΠΈ элСмСнтами ΡΠ²Π»ΡΡŽΡ‚ΡΡ остаток G Π² ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ +1 ΠΈ остаток A Π² ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ -3. мРНК, Π² ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΉ отсутствуСт консСнсусная ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Козака, ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ эффСктивно Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ Π² эукариотичСских бСсклСточных систСмах, Ссли ΠΎΠ½Π° ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°Π΅Ρ‚ ΡƒΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½Π½ΠΎ Π΄Π»ΠΈΠ½Π½ΠΎΠΉ 5′-нСтранслируСмой ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΡŒΡŽ (UTR), Π² ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΉ отсутствуСт ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ вторичная структура.

Π£ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΉ рибосома направляСтся ΠΊ мСсту ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ AUG Π±ΠΎΠ³Π°Ρ‚ΠΎΠΉ ΠΏΡƒΡ€ΠΈΠ½Π°ΠΌΠΈ ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΡŒΡŽ, Π½Π°Π·Ρ‹Π²Π°Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ Π¨Π°ΠΉΠ½Π°-Π”Π°Π»ΡŒΠ³Π°Ρ€Π½ΠΎ (SD). Π­Ρ‚Π° ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Ρ€Π½Π° 3′-ΠΊΠΎΠ½Ρ†Ρƒ 16s Ρ€Π ΠΠš Π² 30S рибосомной ΡΡƒΠ±ΡŠΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ†Π΅. Π’Ρ‹ΡˆΠ΅ ΠΎΡ‚ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π° AUG ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΡŒ SD ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡƒΡΠ½ΡƒΡŽ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ 5′-UAAGGAGGUGA-3′. ΠšΠΎΠ½ΠΊΡ€Π΅Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ мРНК Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π°ΡŽΡ‚ΡΡ ΠΏΠΎ количСству Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄ΠΎΠ², ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΡΡŽΡ‚ Π°Π½Ρ‚ΠΈ-Π¨Π°ΠΉΠ½-Π”Π°Π»ΡŒΠ³Π°Ρ€Π½ΠΎ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ 16S Ρ€Π ΠΠš, ΠΎΡ‚ Π΄Π²ΡƒΡ… Π΄ΠΎ дСвяти ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅. ПолоТСниС сайта связывания рибосомы (RBS) ΠΏΠΎ ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΡŽ ΠΊ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ‚ΠΎΡ€Ρƒ AUG ΠΎΡ‡Π΅Π½ΡŒ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ для эффСктивности трансляции (ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ ΠΎΡ‚ -6 Π΄ΠΎ -10 ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ A сайта ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ).

Π”ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ ΠΈΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΡŽ см. Π² Ρ€Π°Π·Π΄Π΅Π»Π΅ «ВрСбования ΠΊ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ сайтов связывания рибосом».

Π’Π΅Ρ€Ρ…

ΠŸΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚Ρ‹ для трансляции in vitro

Компания Ambion Π² настоящСС врСмя ΠΏΡ€Π΅Π΄Π»Π°Π³Π°Π΅Ρ‚ ΠΎΠ΄Π½Ρƒ Π±Π΅ΡΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½ΡƒΡŽ систСму трансляции:

Retic Lysate IVT Kit: Для эффСктивной трансляции транскриптов, синтСзированных in vitro, ΠΏΠΎΠ»ΠΈ(А) ΠΈ Ρ‚ΠΎΡ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ РНК.

Π’Π΅Ρ€Ρ…

ΠŸΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΏΡ€Π°ΠΉΠΌΠ΅Ρ€ΠΎΠ² для трансляционных ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†, созданных с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ПЦР

Π”ΠΠš-ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Ρ‹ для трансляции с использованиСм «сопряТСнной» ΠΈΠ»ΠΈ «связанной» транскрипции: систСмы трансляции ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π»Π΅Π³ΠΊΠΎ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Ρ‚ΡŒ с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ПЦР. НиТС прСдставлСны располоТСнныС Π²Ρ‹ΡˆΠ΅ (5′) ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΏΡ€Π°ΠΉΠΌΠ΅Ρ€ΠΎΠ² для получСния ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ² ПЦР для управляСмой Π’7 транскрипции ΠΈ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ трансляции Π² Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π΅ сСтчатки ΠΈ 9Экстракт 0067 E. coli соотвСтствСнно. ΠžΠ±Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅ Π²Π½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΠ΅, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ доступны систСмы трансляции, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Ρ‹ T3 ΠΈΠ»ΠΈ SP6. Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Ρ‚ΡŒ ΡˆΠ°Π±Π»ΠΎΠ½Ρ‹ ПЦР для Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΡ… ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·, просто ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡ‚Π΅ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΠΎΡ‚ΠΎΡ€Π° T7 Π½Π° ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ T3 ΠΈΠ»ΠΈ SP6.


Top

ΠžΡΠ½ΠΎΠ²Ρ‹: трансляция in vitro | Thermo Fisher Scientific

Π‘ΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π· Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² in vitro Π² бСсклСточных экстрактах являСтся Π²Π°ΠΆΠ½Ρ‹ΠΌ инструмСнтом для молСкулярных Π±ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΎΠ² ΠΈ ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ мноТСство ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ, Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Ρ Π±Ρ‹ΡΡ‚Ρ€ΡƒΡŽ ΠΈΠ΄Π΅Π½Ρ‚ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΡŽ Π³Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ² (Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€, ΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅ΠΎΠΌΠΈΠΊΠ°), Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΌΡƒΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΉ посрСдством синтСза ΡƒΠΊΠΎΡ€ΠΎΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Π³Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ², исслСдования Ρ„ΠΎΠ»Π΄ΠΈΠ½Π³Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡ„ΠΈΡ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ΠΏΡ€ΠΈΡ€ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Ρ… аминокислот для Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… исслСдований. ИспользованиС систСм трансляции in vitro ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΈΠΌΠ΅Ρ‚ΡŒ прСимущСства ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄ ЭкспрСссия Π³Π΅Π½Π° in vivo , ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° свСрхэкспрСссированный ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ токсичСн для ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ-хозяина, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ нСрастворим ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΡƒΠ΅Ρ‚ Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡ†Π° Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ, ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° Π±Π΅Π»ΠΎΠΊ подвСргаСтся быстрой протСолитичСской Π΄Π΅Π³Ρ€Π°Π΄Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Π°Π·Π°ΠΌΠΈ. Π’ ΠΏΡ€ΠΈΠ½Ρ†ΠΈΠΏΠ΅ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Π° Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΏΡ€ΠΈΠ³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²ΠΈΡ‚ΡŒ бСсклСточный экстракт для in vitro трансляции мРНК ΠΈΠ· любого Ρ‚ΠΈΠΏΠ° ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ. На ΠΏΡ€Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠΊΠ΅ Π±Ρ‹Π»ΠΎ Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½ΠΎ лишь нСсколько бСсклСточных систСм для синтСза Π±Π΅Π»ΠΊΠ° in vitro . Как ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, эти систСмы происходят ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ, Π²ΠΎΠ²Π»Π΅Ρ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Π² высокий ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π΅Π½ΡŒ синтСза Π±Π΅Π»ΠΊΠ°. Π’ этой ΡΡ‚Π°Ρ‚ΡŒΠ΅ Π±ΡƒΠ΄ΡƒΡ‚ ΠΎΠ±ΡŠΡΡΠ½Π΅Π½Ρ‹ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄Ρ‹ ΠΊ синтСзу Π±Π΅Π»ΠΊΠ° in vitro (трансляция ΠΎΡ‡ΠΈΡ‰Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ РНК ΠΏΠΎ ΡΡ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡŽ с «связанной» ΠΈ «связанной» транскрипциСй: трансляция), Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ описаны основныС различия ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ эукариотичСскими ΠΈ прокариотичСскими бСсклСточными систСмами.
Β 

БыстрыС ссылки

  • Cell Free Expression
  • Translation Systems
  • Wheat Germ Extract
  • E. coli Cell-Free System
  • «Linked» & «Coupled» Systems
  • Important Elements
  • Products
  • Primer Sequences
  • Ordering Π˜Π½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΡ

БСсклСточныС систСмы экспрСссии

НаиболСС часто ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Π΅ бСсклСточныС систСмы трансляции состоят ΠΈΠ· экстрактов Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°, Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ ΠΈ ΠΊΠΈΡˆΠ΅Ρ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠ°Π»ΠΎΡ‡ΠΊΠΈ. ВсС ΠΎΠ½ΠΈ готовятся Π² Π²ΠΈΠ΄Π΅ сырых экстрактов, содСрТащих всС макромолСкулярныС ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚Ρ‹ (70S ΠΈΠ»ΠΈ 80S рибосомы, Ρ‚Π ΠΠš, Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠ°Ρ†ΠΈΠ»-Ρ‚Π ΠΠš-синтСтазы, Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ, элонгации ΠΈ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΈ Ρ‚. Π΄.), Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡ‹Π΅ для трансляции экзогСнной РНК. Для обСспСчСния эффСктивной трансляции ΠΊΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ экстракт Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ΅Π½ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ аминокислотами, источниками энСргии (АВЀ, Π“Π’Π€), ΡΠ½Π΅Ρ€Π³ΠΎΡ€Π΅Π³Π΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠΌΠΈ систСмами (крСатинфосфат ΠΈ крСатинфосфокиназа для эукариотичСских систСм ΠΈ фосфоСнолпируват ΠΈ ΠΏΠΈΡ€ΡƒΠ²Π°Ρ‚ΠΊΠΈΠ½Π°Π·Π° для Π•. 9).0003 coli lysate) ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΡ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ (Mg2+, K+ ΠΈ Π΄Ρ€.).

БущСствуСт Π΄Π²Π° ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄Π° ΠΊ синтСзу Π±Π΅Π»ΠΊΠ° in vitro Π½Π° основС исходного гСнСтичСского ΠΌΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Π°: РНК ΠΈΠ»ΠΈ Π”ΠΠš. Π‘Ρ‚Π°Π½Π΄Π°Ρ€Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ систСмы трансляции, Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Ρ‹ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΈ экстракты Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚ РНК Π² качСствС ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Ρ‹; Ρ‚ΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ°ΠΊ «связанныС» ΠΈ «связанныС» систСмы Π½Π°Ρ‡ΠΈΠ½Π°ΡŽΡ‚ΡΡ с ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ† Π”ΠΠš, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠΊΡ€ΠΈΠ±ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ Π² РНК, Π° Π·Π°Ρ‚Π΅ΠΌ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ. КаТдая ΠΈΠ· этих систСм обсуТдаСтся Π½ΠΈΠΆΠ΅.

Π’Π΅Ρ€Ρ…

БистСмы ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π²ΠΎΠ΄Π°

Π›ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°
Π›ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ° прСдставляСт собой Π²Ρ‹ΡΠΎΠΊΠΎΡΡ„Ρ„Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΡƒΡŽ систСму синтСза эукариотичСских Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² in vitro, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅ΠΌΡƒΡŽ для трансляции экзогСнных РНК (Π»ΠΈΠ±ΠΎ ΠΏΡ€ΠΈΡ€ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Ρ…, Π»ΠΈΠ±ΠΎ созданных in vitro). In vivo Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚Ρ‹ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΡΡ‚Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‚ собой высокоспСциализированныС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ, Π² ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΡƒΡŽ ΠΎΡ‡Π΅Ρ€Π΅Π΄ΡŒ отвСтствСнныС Π·Π° синтСз Π³Π΅ΠΌΠΎΠ³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½Π°, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ составляСт Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ 90% Π±Π΅Π»ΠΊΠ°, Π²Ρ‹Ρ€Π°Π±Π°Ρ‚Ρ‹Π²Π°Π΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠΌ. Π­Ρ‚ΠΈ Π½Π΅Π·Ρ€Π΅Π»Ρ‹Π΅ эритроциты ΡƒΠΆΠ΅ потСряли свои ядра, Π½ΠΎ содСрТат Π°Π΄Π΅ΠΊΠ²Π°Ρ‚Π½ΡƒΡŽ мРНК, Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΏΠΎΠ»Π½Ρ‹ΠΉ Π°ΠΏΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚ трансляции для интСнсивного синтСза Π³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½Π°. ЭндогСнная мРНК Π³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½Π° ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΡƒΠ΄Π°Π»Π΅Π½Π° ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ с Π‘Π°2+-зависимой ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΊΠΎΠΊΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·ΠΎΠΉ, которая ΠΏΠΎΠ·ΠΆΠ΅ инактивируСтся Ρ…Π΅Π»Π°Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π‘Π°2+ с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ EGTA. Ambion ΠΏΡ€Π΅Π΄Π»Π°Π³Π°Π΅Ρ‚ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·ΠΎΠΉ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ². Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ Ρ‚ΠΈΠΏ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° являСтся Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡˆΠΈΡ€ΠΎΠΊΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅ΠΌΠΎΠΉ РНК-зависимой бСсклСточной систСмой ΠΈΠ·-Π·Π° Π΅Π³ΠΎ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠ³ΠΎ Ρ„ΠΎΠ½Π° ΠΈ эффСктивного использования экзогСнных РНК Π΄Π°ΠΆΠ΅ Π² Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΡ… концСнтрациях (рис. 1). Π­ΠΊΠ·ΠΎΠ³Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ ΡΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π·ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ со ΡΠΊΠΎΡ€ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ, Π±Π»ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ ΠΊ наблюдаСмой Π² ΠΈΠ½Ρ‚Π°ΠΊΡ‚Π½Ρ‹Ρ… Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚Π°Ρ€Π½Ρ‹Ρ… ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ….

Рис. 1. Бтандартная ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€Π° трансляции in vitro с использованиСм Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ° ΠΈΠ»ΠΈ экстракта Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹.

НСобработанный Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² транслируСт ΡΠ½Π΄ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ Π³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡƒΡŽ мРНК, ΡΠΊΠ·ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ РНК ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈ Ρ‚ΠΎ, ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΎΠ΅. Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ Ρ‚ΠΈΠΏ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅Ρ‚ΡΡ для изучСния ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠ° трансляции, Π½Π°ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€. ΠΈΠ·ΡƒΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ влияния ΠΈΠ½Π³ΠΈΠ±ΠΈΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ² Π½Π° Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΡΡ†ΠΈΡŽ Π³Π»ΠΎΠ±ΠΈΠ½Π°. Как Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Π΅, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Ρ‹ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ° ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡŽΡ‚ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·Π½ΠΎΠΉ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ ΠΈ способны ΡΠΈΠ½Ρ‚Π΅Π·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ большоС количСство ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚Π°. Оба Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° подходят для синтСза Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΊΡ€ΡƒΠΏΠ½Ρ‹Ρ… Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈΠ· кэпированных ΠΈΠ»ΠΈ нСкэпированных РНК (эукариотичСских ΠΈΠ»ΠΈ вирусных).

Π’Π΅Ρ€Ρ…

Экстракт Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹

Экстракт Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ являСтся ΡƒΠ΄ΠΎΠ±Π½ΠΎΠΉ Π°Π»ΡŒΡ‚Π΅Ρ€Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²ΠΎΠΉ бСсклСточной систСмС с Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ΠΎΠΌ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°. Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ экстракт ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠ΅ Ρ„ΠΎΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠ΅ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈΠ·-Π·Π° Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠ³ΠΎ уровня эндогСнной мРНК. Π›ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ эффСктивно транслируСт ΡΠΊΠ·ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ РНК Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΎΡ€Π³Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠ², ΠΎΡ‚ вирусов ΠΈ Π΄Ρ€ΠΎΠΆΠΆΠ΅ΠΉ Π΄ΠΎ Π²Ρ‹ΡΡˆΠΈΡ… растСний ΠΈ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ…. Экстракт Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ рСкомСндуСтся для трансляции РНК, содСрТащСй нСбольшиС Ρ„Ρ€Π°Π³ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Ρ‹ Π΄Π²ΡƒΡ…Ρ†Π΅ΠΏΠΎΡ‡Π΅Ρ‡Π½ΠΎΠΉ РНК ΠΈΠ»ΠΈ окислСнныС Ρ‚ΠΈΠΎΠ»Ρ‹, ΠΈΠ½Π³ΠΈΠ±ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°. Экстракты ΠΊΠ°ΠΊ retic, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ РНК, Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΈ Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ Π³Π΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΠ΅ΠΌΡƒΡŽ транскрипция in vitro (см. рис. 1). ΠŸΡ€ΠΈ использовании РНК, синтСзированной in vitro , Π½Π°Π»ΠΈΡ‡ΠΈΠ΅ 5′-кэп-структуры ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΡƒΡΠΈΠ»ΠΈΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΡΡ†ΠΈΠΎΠ½Π½ΡƒΡŽ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ. Как ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, трансляция с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ экстрактов Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ большС зависит ΠΎΡ‚ кэпа, Ρ‡Π΅ΠΌ трансляция с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ экстрактов Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΠ°. Если кэпированиС РНК Π½Π΅Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΈ Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΈΠ· нСкэпированной мРНК Π½ΠΈΠ·ΠΎΠΊ, ΠΊΠΎΠ΄ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΡƒΡŽ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΡƒΠ±ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Π² прокариотичСский Π²Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ ΠΈ ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ нСпосрСдствСнно с Π”ΠΠš-ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Ρ‹ Π² бСсклСточной систСмС E. coli .

Π’Π΅Ρ€Ρ…

БСсклСточная систСма E.

coli

БСсклСточная систСма E. coli состоит ΠΈΠ· Π½Π΅ΠΎΡ‡ΠΈΡ‰Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ экстракта, Π±ΠΎΠ³Π°Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ эндогСнной мРНК. Экстракт ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ Π²ΠΎ врСмя приготовлСния, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ эта эндогСнная мРНК Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»Π°ΡΡŒ ΠΈ впослСдствии Ρ€Π°Π·Ρ€ΡƒΡˆΠ°Π»Π°ΡΡŒ. ΠŸΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΡƒ ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½ΠΈ эндогСнной мРНК Π² ΠΏΡ€ΠΈΠ³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠΌ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π΅ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΠ΅, экзогСнный ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ Π»Π΅Π³ΠΊΠΎ идСнтифицируСтся. По ΡΡ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡŽ с эукариотичСскими систСмами экстракт E. coli ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ простой Π°ΠΏΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚ трансляции с ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ слоТным ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»Π΅ΠΌ Π½Π° ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½Π΅ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ позволяСт этой систСмС Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΠΎΡ‡Π΅Π½ΡŒ эффСктивной Π² синтСзС Π±Π΅Π»ΠΊΠ°. Π‘Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ экстракты часто Π½Π΅ΠΏΡ€ΠΈΠ³ΠΎΠ΄Π½Ρ‹ для трансляции РНК, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΊΠ°ΠΊ экзогСнная РНК быстро расщСпляСтся эндогСнными Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·Π°ΠΌΠΈ. Π•ΡΡ‚ΡŒ Π½Π΅ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ вирусныС мРНК (TMV, STNV ΠΈ MS2), ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ эффСктивно Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ, ΠΏΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΡƒ ΠΎΠ½ΠΈ нСсколько устойчивы ΠΊ активности Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π· ΠΈ содСрТат ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΡ‡Π½ΡƒΡŽ структуру. Однако 9Экстракты 0067 E. coli идСально подходят для сопряТСнной транскрипции:трансляции с ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ† Π”ΠΠš.

Π’Π΅Ρ€Ρ…

«Бвязанная» ΠΈ «связанная» транскрипция: систСмы трансляции

Π’ стандартных рСакциях трансляции очищСнная РНК ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅Ρ‚ΡΡ Π² качСствС ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Ρ‹ для трансляции. Π‘ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΎΠΉ стороны, «связанныС» ΠΈ «связанныС» систСмы ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚ Π”ΠΠš Π² качСствС шаблона. РНК транскрибируСтся с Π”ΠΠš ΠΈ Π·Π°Ρ‚Π΅ΠΌ транслируСтся Π±Π΅Π· ΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΉ-Π»ΠΈΠ±ΠΎ очистки. Π’Π°ΠΊΠΈΠ΅ систСмы ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ ΡΠΎΡ‡Π΅Ρ‚Π°ΡŽΡ‚ РНК-ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·Ρƒ прокариотичСского Ρ„Π°Π³Π° ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΠΎΡ‚ΠΎΡ€ (T7, T3 ΠΈΠ»ΠΈ SP6) с экстрактами эукариот ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΊΠ°Ρ€ΠΈΠΎΡ‚ для синтСза Π±Π΅Π»ΠΊΠΎΠ² ΠΈΠ· экзогСнных ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ† Π”ΠΠš. ΠœΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Ρ‹ Π”ΠΠš для Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΉ транскрипции:трансляции ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Ρ‹ Π² ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄Π½Ρ‹Π΅ Π²Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ ΠΈΠ»ΠΈ созданы с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ПЦР (ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΏΡ€Π°ΠΉΠΌΠ΅Ρ€ΠΎΠ² для трансляционных ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†, Π³Π΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Ρ… ПЦР).

Linked Transcription:Translation
«Бвязанная» систСма прСдставляСт собой Π΄Π²ΡƒΡ…ΡΡ‚Π°Π΄ΠΈΠΉΠ½ΡƒΡŽ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΡŽ, ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡƒΡŽ Π½Π° транскрипции ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π°Π·ΠΎΠΉ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΎΡ„Π°Π³Π° с ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ трансляциСй Π² Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π΅ Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ° ΠΈΠ»ΠΈ Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π΅ Π·Π°Ρ€ΠΎΠ΄Ρ‹ΡˆΠ΅ΠΉ ΠΏΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ†Ρ‹ (рис. 2). ΠŸΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΡƒ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΈ транскрипции ΠΈ трансляции ΡΠ²Π»ΡΡŽΡ‚ΡΡ ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌΠΈ, каТдая ΠΈΠ· Π½ΠΈΡ… ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π° для обСспСчСния ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΠ³ΠΎ функционирования ΠΎΠ±ΠΎΠΈΡ…. И Π½Π°ΠΎΠ±ΠΎΡ€ΠΎΡ‚, ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΠ΅ коммСрчСски доступныС эукариотичСскиС сопряТСнныС систСмы транскрипции: трансляции скомпромСтировали ΠΎΠ΄Π½Ρƒ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ±Π΅ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΈ, Ρ‚Π°ΠΊ Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΎΠ½ΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ ΠΏΡ€ΠΎΠΈΡΡ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ Π² ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠ΅. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ приносится Π² ΠΆΠ΅Ρ€Ρ‚Π²Ρƒ удобству.

Рисунок 2. Linked in Vitro ΠŸΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€Π° транскрипции ΠΈ трансляции с использованиСм Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π° Ρ€Π΅Ρ‚ΠΈΠΊΡƒΠ»ΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΠΊΠ°.

ΠŸΠ°Ρ€Π½Π°Ρ транскрипция: трансляция
Π’ ΠΎΡ‚Π»ΠΈΡ‡ΠΈΠ΅ ΠΎΡ‚ эукариотичСских систСм, Π² ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… транскрипция ΠΈ трансляция происходят ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ, Π² E. coli транскрипция ΠΈ трансляция происходят Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, систСмы трансляции E. coli in vitro Π²Ρ‹ΠΏΠΎΠ»Π½ΡΡŽΡ‚ΡΡ Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΆΠ΅ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, Π² сочСтании, Π² ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΈ Ρ‚ΠΎΠΉ ΠΆΠ΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠ΅ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΎΠ΄Π½ΠΈΡ… ΠΈ Ρ‚Π΅Ρ… ΠΆΠ΅ условиях Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΈ (одностадийная рСакция; рис. 3). Π’ΠΎ врСмя транскрипции 5′-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ† РНК становится доступным для связывания с рибосомой ΠΈ подвСргаСтся трансляции, Π² Ρ‚ΠΎ врСмя ΠΊΠ°ΠΊ Π΅Π΅ 3′-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ† всС Π΅Ρ‰Π΅ транскрибируСтся. Π­Ρ‚ΠΎ Ρ€Π°Π½Π½Π΅Π΅ связываниС рибосом с РНК ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅Ρ€ΠΆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ‚ ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ транскрипта ΠΈ способствуСт эффСктивной трансляции. Π­Ρ‚Π° Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Π°Ρ систСма трансляции обСспСчиваСт ΡΡ„Ρ„Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΡƒΡŽ ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡŽ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ² ΠΊΠ°ΠΊ прокариотичСских, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ эукариотичСских Π³Π΅Π½ΠΎΠ² Π·Π° ΠΊΠΎΡ€ΠΎΡ‚ΠΊΠΈΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΠ΅ΠΆΡƒΡ‚ΠΎΠΊ Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ. Для максимального Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΈ Π½Π°ΠΈΠ»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ΠΉ точности ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ ΡƒΠ±Π΅Π΄ΠΈΡ‚Π΅ΡΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Π° Π”ΠΠš ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ сайт связывания рибосом Π¨Π°ΠΉΠ½Π°-Π”Π°Π»ΡŒΠ³Π°Ρ€Π½ΠΎ Π²Ρ‹ΡˆΠ΅ ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π° ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ‚ΠΎΡ€Π°. ΠšΡΠΏΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ эукариотичСской РНК Π½Π΅ трСбуСтся. ИспользованиС 9Экстракт 0067 E. coli Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ устраняСт ΠΏΠ΅Ρ€Π΅ΠΊΡ€Π΅ΡΡ‚Π½ΡƒΡŽ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΈΠ»ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠ΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΡ‹, связанныС с эндогСнными Π±Π΅Π»ΠΊΠ°ΠΌΠΈ Π² эукариотичСских Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚Π°Ρ…. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, систСма экстрактов E. coli S30 допускаСт ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡŽ ΠΈΠ· Π”ΠΠš-Π²Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ², содСрТащих ΠΏΡ€ΠΈΡ€ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΠΎΡ‚ΠΎΡ€Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ E. coli (Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΊΠ°ΠΊ lac ΠΈΠ»ΠΈ tac).

Рис. 3. Бвязанная транскрипция in vitro: ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€Π° трансляции с использованиСм экстракта E. coli.

Π’Π΅Ρ€Ρ…

Π’Π°ΠΆΠ½Ρ‹Π΅ элСмСнты для трансляции

Π‘ΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‚ Π½Π΅ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ сущСствСнныС различия ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ транскриптами мРНК ΠΏΡ€ΠΎΠΊΠ°Ρ€ΠΈΠΎΡ‚ ΠΈ эукариот. Как ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, эукариотичСскиС мРНК Ρ…Π°Ρ€Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ·ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ двумя посттранскрипционными модификациями: 5′-7-ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΈΠ»-GTP-кэп ΠΈ 3′-ΠΏΠΎΠ»ΠΈ(А)-хвост. ОбС ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΠΈ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‚ ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ мРНК, прСдотвращая Π΄Π΅Π³Ρ€Π°Π΄Π°Ρ†ΠΈΡŽ. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, структура 5′-кэпа усиливаСт Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΡΡ†ΠΈΡŽ мРНК, помогая ΡΠ²ΡΠ·Ρ‹Π²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ с эукариотичСской рибосомой ΠΈ обСспСчивая распознаваниС ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π° AUG. Π­Ρ‚Π° функция ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π²Π°Ρ€ΡŒΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ Π² зависимости ΠΎΡ‚ систСмы трансляции ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡ€Π΅Ρ‚Π½ΠΎΠΉ синтСзируСмой мРНК. ΠšΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡƒΡΠ½Π°Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ 5′-GCCACCAUGG-3′, Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ извСстная ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ «Козака», считаСтся самым ΡΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌ сигналом связывания рибосом Π² эукариотичСской мРНК. Для эффСктивной ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ трансляции ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π²Ρ‹ΠΌΠΈ элСмСнтами ΡΠ²Π»ΡΡŽΡ‚ΡΡ остаток G Π² ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ +1 ΠΈ остаток A Π² ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ -3. мРНК, Π² ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΉ отсутствуСт консСнсусная ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Козака, ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ эффСктивно Ρ‚Ρ€Π°Π½ΡΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ Π² эукариотичСских бСсклСточных систСмах, Ссли ΠΎΠ½Π° ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°Π΅Ρ‚ ΡƒΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½Π½ΠΎ Π΄Π»ΠΈΠ½Π½ΠΎΠΉ 5′-нСтранслируСмой ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΡŒΡŽ (UTR), Π² ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΉ отсутствуСт ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ вторичная структура.

Π£ Π±Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΉ рибосома направляСтся ΠΊ мСсту ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΠΈ AUG Π±ΠΎΠ³Π°Ρ‚ΠΎΠΉ ΠΏΡƒΡ€ΠΈΠ½Π°ΠΌΠΈ ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΡŒΡŽ, Π½Π°Π·Ρ‹Π²Π°Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ Π¨Π°ΠΉΠ½Π°-Π”Π°Π»ΡŒΠ³Π°Ρ€Π½ΠΎ (SD). Π­Ρ‚Π° ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Ρ€Π½Π° 3′-ΠΊΠΎΠ½Ρ†Ρƒ 16s Ρ€Π ΠΠš Π² 30S рибосомной ΡΡƒΠ±ΡŠΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ†Π΅. Π’Ρ‹ΡˆΠ΅ ΠΎΡ‚ ΠΈΠ½ΠΈΡ†ΠΈΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π° AUG ΠΎΠ±Π»Π°ΡΡ‚ΡŒ SD ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡƒΡΠ½ΡƒΡŽ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ 5′-UAAGGAGGUGA-3′. ΠšΠΎΠ½ΠΊΡ€Π΅Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ мРНК Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π°ΡŽΡ‚ΡΡ ΠΏΠΎ количСству Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΎΡ‚ΠΈΠ΄ΠΎΠ², ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΡΡŽΡ‚ Π°Π½Ρ‚ΠΈ-Π¨Π°ΠΉΠ½-Π”Π°Π»ΡŒΠ³Π°Ρ€Π½ΠΎ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ 16S Ρ€Π ΠΠš, ΠΎΡ‚ Π΄Π²ΡƒΡ… Π΄ΠΎ дСвяти ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅.

Π”ΠΎΠ±Π°Π²ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΊΠΎΠΌΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Ρ€ΠΈΠΉ

Π’Π°Ρˆ адрСс email Π½Π΅ Π±ΡƒΠ΄Π΅Ρ‚ ΠΎΠΏΡƒΠ±Π»ΠΈΠΊΠΎΠ²Π°Π½. ΠžΠ±ΡΠ·Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ поля ΠΏΠΎΠΌΠ΅Ρ‡Π΅Π½Ρ‹ *